巴拉圭药用植物对5-脂氧合酶的抑制作用

    白三烯在炎症性疾病的宿主防御反应中为重要介质,具有影响细胞迁移、肌肉收缩、血管通透性和溶酶体酶释放的作用。白三烯是花生四烯酸经5一脂氧合酶代谢产生的物质,因此5一脂氧合酶抑制剂很有可能成为治疗炎症性疾病、哮喘和关节炎的药物。为了寻找抗炎药物,本次研究了11种巴拉圭药用植物对5一脂氧合酶的抑制作用。

    材料和方法:植物(lkg)用甲醇(SL)室温连续浸提24h,减压回收溶剂,得甲醇提取物,提取物以水和乙酸乙酷分配,得水提取物I和乙酸乙酷提取物,水提取物I再用正丁醇萃取,得正丁醇提取物和水提取物II。

    5一脂氧合酶活性的测定:反应混合液的终容积300林1中含有1.3uM 花生四烯酸,240ul 29 mM磷酸缓冲液,300ul细胞裂解液(鼠嗜碱白血病细胞RBL-1)和30um植物提取物样品溶液(二甲亚枫)。此反应液37°C温育1Smin,加600ul丙酮终止反应,加50ul2N甲酸酸化,再用氯仿萃取。氯仿萃取液浓缩后,进行硅胶薄层层析,苯-1声二唔烷一乙酸(80:10:3)展开,用放射分析法测定5-轻基二十碳四烯酸的含量。

    结果:Elinorus latifloius和Ilex paraguariensis(冬青属)的甲醇提取物具有强5一脂氧合酶抑制活性;Aristolochia triangularis(马兜铃科)和Gomphrena perennis(千日红属)的甲醇提取物、A. Triangularis和I. Paraguariensis的水提取物II及刺苞果(Acanthospermum australe), Phyllanthus orbiculatus(叶下珠属)、E. latiflorus、番樱桃(Eugenia myr-cianthes,桃金娘科)、G. peTenni的正丁醇提取物活性较弱;I. paraguariensis, P. Orbicu-latus, E. latiflorus和G. perenni的乙酸乙酷提取物显示很强的活性,其中E. latiflorus的乙酸乙酷提取物活性最强,与典型的5-脂氧合酶抑制剂芬尼东(phenidone)类似。E. latiflorus的乙酸乙酷提取物经反复硅胶柱层析,得到活性部位A,对5一脂氧合酶的抑制活性呈浓度依赖性,IC为3ug/ml 。